试验方法丨医疗器械生物学评价——阴道刺激

阴道刺激试验

通过进行阴道粘膜刺激试验，我们可以模拟产品在实际使用中对阴道黏膜的影响，从而评估其安全性和刺激性，为产品上市提供科学依据，为消费者提供更加安全、可靠的产品，从而保护消费者的健康。

阴道刺激试验应仅考虑用于预期与阴道组织接触的材料:

医疗器械：如妇科检查器械、阴道给药器等。

计生用品：如避孕套、避孕环等。

卫生用品：如卫生巾、护垫、湿巾等。

消毒用品：如女性洗液、消毒凝胶等。

并且只有在用其他方法不能得到安全性数据的情况下才考虑进行 。

试验依据

医疗器械生物学评价 第10 部分:刺激与皮肤致敏试验GB/T 16886.10-2017附录B.6

医疗器械生物学评价 第 10 部分:刺激与迟发型超敏反应试验 IS0 10993-10:2010

一次性使用卫生用品卫生标准 G 15979-2002

医疗器械的生物学评价 第 23 部分:刺激性试验 ISO10993-23:2021附录D.6

一般采用以上四种标准中推荐的方法对样品原液/样品浸提液引起阴道组织刺激反应的潜在性进行评价。

应排除的试验材料

任何已显示为皮肤或眼的刺激物,或 pH≤2. 0或 ≥11. 5的材料不应再进行试验,可标示为潜在的阴道组织刺激物。

试验材料

在进行试验以及解释刺激/致敏试验数据时,应考虑医疗器械在人体应用时的接触性质、程度、频率、时间和条件等因素,对这些试验最关键的因素之一就是试验材料的制备 。

浸提条件建立在通常可行并经论证为一个标准化方法的基础之上,在多数情况下为产品使用 的适当加严的条件。应在下列之一的条件下进行浸提：

a)    (37±1) ℃     (72±2)h;

b)    (50±2) ℃     (72±2)h;

c)    (70±2) ℃      (24±2)h;

d)    (121±2) ℃    (1±0. 1)h。

标准表面积和浸提液体积

注:由于制造过程原因,许多弹性体表面特性可能与一般块状材料的表面特性有所不同。

浸提时应使用极性和非极性两种溶剂。浸提介质示例:

a)    极性浸提介质:水、生理盐水;

b)   非极性浸提介质:符合各国药典质量规定的新鲜精制植物油(如棉籽油或芝麻油);

c)    其他浸提介质:乙醇/水、乙醇/生理盐水、聚乙二醇400(稀释至生理渗透压)、二甲基亚砜。

动物与管理

应使用健康、初成年的雌性白化兔,同一 品系,体重不低于2kg。如使用其他种属应经过论证。

应使动物适应环境,并按 ISO10993-2的规定饲养。

初试应至少使用3只动物评价试验材料,另取3只动物作为对照组。

初试反应如疑似或不明确时,应考虑进行复试。

每次试验操作前应检查动物阴道溢液、水肿和/或其他感染、刺激和/或损伤迹象。在动物发情期阶段也应检查阴道,以避免由于阴道的生理变化而作出假阳性反应判定。

试验步骤

试验样品制备

将试验动物置于固定器中固定

将一短软管(6cm)或一钝头插管与一容量大于 1mL的注射器连接 , 注射器和导管注满后可使动物能接受1mL试验样品。应为每只动物分别准备一套注射器和连接导管。

导管可用对照液或适当的润滑剂湿润处理。

提起动物尾巴暴露出阴道口 ,然后将湿润处理过的导管轻柔地插入阴道,用注射器注入1mL试验样品。抽出导管并以适当的方法处置掉。

由于动物个体阴道容积的差异性 ,试验样品注入时或注入后可能会有溢出,可用软纸巾轻轻拭去溢出的液体。

每次间隔(24±2)h重复上述步骤 ,至少连续5d。

对于长期重复接触试验 ,应根据预期临床应用情况确定试验用量、接触次数、时间和间隔期。

动物观察

初次接触后(24±2)h和每次试验操作前注意并记录阴道口和会阴部位溢液、红斑和水肿迹象。

对于出现过度溢液、红斑或难以给药的动物,应无痛处死后做组织学检查。

结果评价

肉眼观察评价

末次接触后(24±2)h无痛处死动物,完整切下阴道后纵向剖开,检查上皮组织层的刺激、损伤以及坏死迹象。

将取下的阴道组织放入适当的固定剂中固定后进行组织学检查。每块阴道组织应取其两端和中央三部分。

将接触过试验材料的动物阴道与对照动物的阴道进行比较。

记录并描述肉眼观察下每只动物阴道组织的状况,注意试验组与对照组之间的差别。

注 : 这些观察可能有助于组织学评价。

组织学评价

应由病理学家对阴道组织的刺激作用进行评价,可按口腔、阴茎、直肠和阴道组织反应显微镜检查记分系统给出的记分系统对每一组织进行评分。试验组全部动物显微镜评价记分相加后再除以观察总数即得出试验组平均记分。最大记分为16。对照组同法计算。

对照组动物出现显微镜评价总分大于9时,表明试验操作中可能造成损伤。如其他试验或对照动物出现同样的高分时,可能有必要进行复试。

组织学评价

氯化钠对照组（阴道上端-阴道下端-阴道中端）

口腔、阴茎、直肠和阴道组织反应显微镜检查记分系统

试验组平均记分减去对照组平均记分即得出刺激指数。

对于长期重复接触试验 ,可将刺激指数表修改为适合于对有关慢性刺激组织反应的评价。

刺激指数表

试验报告

试验报告应包括 :

a)    试验样品的描述 ;

b)   试验样品预期用途/应用 ;

c)    制备样品所用方法的详细描述 ;

d)   试验动物的描述 ;

e)    接触方法 ;

f)    试验部位记分 ;

g)    观察记录 ;

h)   组织学评价 ;

i)    结果评定 。